Estudio de la capacidad infectiva, colonización renal e inmunogenicidad de Leptospira interrogans serogrupo Pomona serovar Kennewicki en un modelo murino sub-letal y crónico

Abstract

Leptospira interrogans sg Pomona sv Kennewicki recientemente reportada como la variante más frecuentemente aislada en bovinos, también fue aislada en brotes de leptospirosis en ovinos y en animales de vida libre (Sous Scrofa) en Uruguay. Su identificación como causa de leptospirosis en humanos confirma además su potencial zoonótico. El objetivo de este estudio fue evaluar atributos de virulencia de L. interrogans sg Pomona sv Kennewicki en un modelo murino de infección a través de la mucosa nasal, mimetizando una vía de infección natural. El aislamiento IP1710039 obtenido de bovinos de un establecimiento donde se registró una tormenta de abortos fue utilizado para infectar por vía intra nasal ratones hembra C57BL/6J de 8 semanas de edad. Se usaron inóculos de 109, 108, 107, 106, 105 y 104 leptospiras (n=5-6 animales por grupo). Se estudió la cinética de diseminación bacteriana en sangre durante 7 días post infección (DPI), la excreción de leptospiras en orina durante 60 DPI y se evaluó la colonización renal a los 15 y 60 DPI mediante amplificación del gen lipL32 por qPCR y cultivo microbiológico. Se estudió la respuesta inmune humoral determinando títulos de anticuerpos anti-leptospira a los 15, 30 y 60 DPI, mediante el test de aglutinación microscópica (MAT). Se observó una disminución significativa en el peso de los animales infectados con las dosis más altas (109, 108) en las primeras 72 horas con respecto al grupo control (inoculado con PBS 1X). Se confirmó leptospiremia positiva a las 48 horas PI para todos los inóculos y a los 7 DPI ya no se detectaron leptospiras en sangre. La excreción urinaria de leptospiras se detectó a partir de los 7 DPI (inóculos más altos) y a partir de los 10 DPI en los animales infectados con los inóculos más bajos. En todos los casos, la cantidad de leptospiras excretadas en orina fue en aumento hasta los 30 DPI, observándose un nivel constante de excreción urinaria hasta los 60 DPI. Se cuantificó la carga de leptospiras en el riñón a los 15 y 60 DPI, y se confirmó la presencia de leptospiras viables mediante cultivo microbiológico. El estudio de la respuesta inmune humoral evidenció la capacidad inmunogénica de esta variante, detectándose anticuerpos específicos independientemente de la dosis infectiva ensayada. El modelo murino de infección a través de mucosas permitió conocer atributos de virulencia de L. interrogans Pomona Kennewicki, demostrando su capacidad infectiva, de diseminación y de colonización del parénquima renal, así como su inmunogenicidad. Es un modelo de interés para evaluar a futuro nuevas formulaciones de vacunas dirigidas a controlar la colonización renal en animales.