Implicancias de la expresión de la proteína S100A9 durante la progresión de la Leucemia Linfoide Crónica

Abstract

La leucemia linfoide crónica (LLC) es una neoplasia de células B que se caracteriza por la expansión clonal de estas células en sangre, médula ósea y órganos linfoides. La progresión de la enfermedad está estrechamente vinculada a la interacción con el microambiente tumoral, que favorece la supervivencia y progresión de las células leucémicas. Nuestro grupo ha descrito previamente la presencia de altos niveles de la proteína pro-inflamatoria S100A9 en microvesículas séricas secretadas por el clon leucémico de pacientes con mal pronóstico. Esta característica distintiva de los linfocitos B en dichos pacientes, junto con una alta expresión del receptor de S100A9, EMMPRIN, desencadena la activación de la vía NF-kB, un eje fundamental en la progresión de la leucemia. (Prieto, Sotelo y Seija et al., 2017). Con base en estos hallazgos, esta tesis busca profundizar en el papel del eje S100A9/EMMPRIN en la progresión tumoral y su potencial terapéutico en LLC. En este trabajo demostramos que EMMPRIN está altamente expresado en células B leucémicas, con una mayor expresión en pacientes progresores en comparación con pacientes indolentes y donantes sanos. Además, su N-glicosilación reveló dos glicoformas: una de alta (HG) y otra de baja (LG) glicosilación, destacándose que la forma HG está asociada con un peor pronóstico y un estadío avanzado según la clasificación de Binet. A partir de esta caracterización, profundizamos el impacto de la interacción entre S100A9 y EMMPRIN en la progresión tumoral. El estudio del eje S100A9/EMMPRIN reveló que su interacción activa múltiples vías de señalización esenciales para la progresión y supervivencia de las células tumorales, como PI3K/AKT, NF-kB y MAPK/JNK. La activación de estas vías modula la expresión de genes relacionados con la resistencia a la apoptosis y la proliferación celular, como MCL-1, BCL-2, p-Rb1 y p27, los cuales desempeñan un papel relevante en la regulación de estos procesos. Además, se encontró que la interacción S100A9/EMMPRIN no solo promueve la supervivencia y proliferación celular, sino que también induce un aumento en la expresión de las quimiocinas CCL3 y CCL4, que favorecen la comunicación entre las células leucémicas y el microambiente tumoral. La activación del eje S100A9/EMMPRIN también parece facilitar la migración de las células leucémicas, al aumentar la expresión de metaloproteinasas de matriz, como MMP2 y MMP9, que contribuyen a la remodelación del microambiente tumoral y favorecen la progresión leucémica. La inhibición de S100A9 con inhibidores específicos, así como el bloqueo de su receptor EMMPRIN, redujo significativamente la activación de dichas vías. Para evaluar la relevancia in-vivo del eje S100A9/EMMPRIN, se realizaron experimentos en colaboración con el Departamento de Inmunología del H. Lee Moffitt Cancer Center, utilizando el modelo murino E-TCL1, que emula mejor la LLC. En estos ratones la sobreexpresión del oncogén TCL1 genera una LLC muy similar a la observada en pacientes con progresión de la enfermedad. Esta cepa fue utilizada para generar un nuevo modelo, el Eμ-TCL1/S100A9 “knock- out”. Tal como habíamos planteado en nuestra hipótesis, los ratones generados deficientes en S100A9 mostraron una mayor supervivencia y una progresión leucémica más lenta, con menor esplenomegalia e infiltración tumoral. Además, la transferencia adoptiva de células S100A9-/- redujo la proliferación del clon leucémico y la linfocitosis, asociándose con una mejor supervivencia. Estos efectos también se replicaron en un modelo de xenoinjerto derivado de pacientes (PDX) tratado con Tasquinimod (inhibidor de S100A9), que redujo significativamente la infiltración leucémica y la esplenomegalia, mejorándose la sobrevida de los ratones. En conjunto, nuestros hallazgos indican que el eje S100A9/EMMPRIN desempeña un papel relevante en la fisiopatología y evolución de la LLC, al promover la activación de vías de señalización críticas para la progresión tumoral. La inhibición específica de este eje posiciona a S100A9 como un potencial blanco terapéutico en la LLC.